En els experiments de reacció en cadena de la polimerasa (PCR), l’embalatge de reactius i mostres afecta directament la precisió i la seguretat dels resultats experimentals. Els procediments d’embalatge PCR estàndard s’han d’adherir estrictament als principis d’esterilitat, prevenció de contaminació i etiquetatge clar. A continuació s’exposen procediments específics.
1. Preparació
Abans de continuar, porteu un abric de laboratori, guants i una màscara per assegurar un entorn net (es recomana un banc net o un armari de bioseguretat). Comproveu que tots els consumibles (per exemple, tubs de centrífuga, plaques PCR) estiguin lliures de contaminació DNase/RNase i utilitzeu autoclaved o enzim - esterilitzadors lliures. Els reactius (per exemple, els primers, ADN de plantilla, enzims, etc.) han de ser aliquotats en vials individuals per evitar la congelació repetida - Els cicles de descongelació.
2. Aliquoting i etiquetatge
Reactius alícues: Utilitzeu una pipeta per dispensar la barreja mestra, els primers, etc. en tubs de centrífuga o pous de placa PCR segons les necessitats experimentals, distribuint amb precisió cada volum al micròlit més proper. Utilitzeu puntes de pipeta d’un sol ús per evitar la contaminació de creu -.
Normes d'etiquetatge: Tots els contenidors han d'estar clarament etiquetats amb el nom, la concentració, la data i el número de l'operador. Es recomana les etiquetes impermeables o el gravat directe per evitar marques il·legibles.
3. Embalatge i segellat
Després de la paralització, estreneu immediatament els taps del tub de centrífuga o segelleu les plaques PCR (utilitzant Heat - Film de segellat o pel·lícula adhesiva especialitzada) per evitar fuites. Per a l’emmagatzematge de termes llargs -, es recomana col·locar l’embalatge en una bossa segellada i afegir un dessecant (com perles de gel de sílice) per mantenir un entorn sec.
4. Emmagatzematge i transport
Després dels envasos, els reactius PCR s’han d’emmagatzemar per separat a - 20 graus (terme llarg -) o 4 graus (a curt termini) per evitar fluctuacions de temperatura. El transport s’ha de realitzar en un contenidor aïllat farcit de material d’amortiment per evitar el xoc i les fuites. Per a mostres biològiques, es requereix el compliment dels requisits d’envasament de bioseguretat en virtut de l’ONU 3373 o de les regulacions rellevants.
Els procediments d’embalatge PCR normalitzats són essencials per a la fiabilitat experimental. El control asèptic estricte i l’etiquetatge clar poden reduir eficaçment els riscos de contaminació i assegurar la precisió de les dades.
